【摘 要】
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目的探讨AMP激活性蛋白激酶(Adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK)激动剂对巨噬细胞ATP结合盒转运体A1(ATP-binding cassette transport A1,ABCA1)表达及
【基金项目】
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国家自然科学基金(NSFC,Grant Number:81273514,91229127)
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目的探讨AMP激活性蛋白激酶(Adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK)激动剂对巨噬细胞ATP结合盒转运体A1(ATP-binding cassette transport A1,ABCA1)表达及其介导胆固醇流出的影响。方法分别应用不同AMPK激动剂AICAR,A769662,具有我国自主知识产权的小分子化合物M-1的有效剂量处理THP-1源性巨噬细胞24h后,Western blot检测细胞内及细胞膜表面ABCA1蛋白水平,Realtime-PCR检测ABCA1 m RNA的变化,通过荧光标记检测细胞内钙离子浓度,应用钙蛋白酶活性检测试剂盒检测细胞内Calpain活性,液体闪烁计数仪检测胞内胆固醇流出,油红O染色观察胞内脂滴情况。结果激活AMPK可上调巨噬细胞ABCA1的表达,并促进其在细胞膜表面分布,但对ABCA1m RNA水平无显著性影响,可降低细胞内钙离子浓度,并抑制钙蛋白酶活性,促进胆固醇流出,抑制胞内脂质蓄积和泡沫细胞形成。结论 AMPK激动剂通过抑制巨噬细胞内钙蛋白酶活性,减少ABCA1蛋白降解,增加ABCA1蛋白在细胞膜表面的分布,进而上调促进胆固醇流出,抑制胞内脂质蓄积和泡沫细胞形成。
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