【摘 要】
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Objectives: Although studies have been undertaken on gadolinium labeling-based molecular imaging in magnetic resonance imaging (MRI), the use of nonionic gadolinium in the tracking of stem cells remai
【机 构】
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Department of Radiology, The Fifth Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University, Zhuhai, Guangdong
【出 处】
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中华放射学学术大会2016、中华医学会第23次全国放射学学术大会暨中华医学会第24次全国影像技术学术大会
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Objectives: Although studies have been undertaken on gadolinium labeling-based molecular imaging in magnetic resonance imaging (MRI), the use of nonionic gadolinium in the tracking of stem cells remains uncommon. This study was to design an orthogonal experiment for further investigation in labeling stem cells with nonionic gadolinium as an MRI contrast agent. Methods: The isolation and cultivation of BMSCs from SD rats was conducted, and a rhodamineconjugated fluorescent reagent was used to label BMSCs of neonatal rats in vitro. The optimal experiment was designed according to a L16(45) initial factor orthogonal experimental table to test MTT value (n=3) with 1×105 cells / ml seeded in a 96-well plate (Corning-Coster, USA). Optimum conditions based on various levels of the test are B1A2D2C3 with total 100 μl of Opti-MEM (Gibco, USA). Subsequently, there was an optimizing labeling efficiency and repeated confirmatory test. Cell uptake efficiency was analyzed through the flow cytometric detection and fluorescence inverted microscope. In addition, MRI scanning was undertaken in vitro. The results were analyzed using SPSS software, version 17.0. Variance analysis and multiple comparisons were used to compare differences. Results: Labeling efficiency by FACS test of group 2 was significantly different from group 1 and the control group, but there were no significantly differences in MTT values among such three groups. The optimal cell-uptaking method was as following: 0.5 μl FI reagents / 1.5 μl Gd solution / 100 μl Opti-MEM, and the mixing and incubation time were as 30 min and 3 hours. Conclusion: Gadodiamide could be transfered into BMSCs with fluorescentconjugated cell uptake reagents. In addition, the present orthogonal experiment could efficiently optimize the labeling conditions.
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