羊流产衣原体的分离培养及间接免疫荧光法鉴定

来源 :中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第五次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yushui223
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  目的:基于流产衣原体MOMP单克隆抗体的间接免疫荧光法检测流产衣原体包涵体抗原。方法:将收集到的疑似或确定为衣原体感染的羊流产胎儿的肝、脾、肺、肾、胃内容物等的混合物接种7日龄鸡胚卵黄囊进行培养,收集4~9日龄死亡鸡胚的卵黄囊膜作为样本,作PCR-RFLP检测;将PCR阳性样本接种于Hela229细胞,培养48h,以鼠抗流产衣原体MOMP单克隆抗体为一抗,FITC标记的羊抗鼠IgG抗体为二抗,用间接免疫荧光法检测流产衣原体包涵体,同时用Giemsa染色对流产衣原体包涵体进行观察。结果:间接免疫荧光染色结果,在Hela229细胞浆内可见呈绿色荧光的衣原体包涵体,Giemsa染色可见蓝紫色包涵体。结论:基于流产衣原体MOMP单克隆抗体的间接免疫荧光法检测流产衣原体包涵体的敏感性较高。
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