外源性SOX9基因修饰干细胞在退变兔椎间盘的组织学观察

来源 :中国康复医学会修复重建外科专业委员会第19次全国学术交流会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:biggertree
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  目的:观察SOX9基因修饰的BMSCs复合海藻酸钠凝胶注射兔椎间盘的组织学变化,观察基因修饰后BMSC的命运及发挥的的生物学效应。方法:抽吸髓核法造兔椎间盘退变模型;体外构建Ad-GFP(对照)和Ad-SOX9-GFP(含目的基因)转染处于对数生长期的BMSCs,同时对其进行CM-DIL红色示踪标记,然后复合海藻酸钠水凝胶;注射入术后3周的退变的椎间隙L2-3,L3-4和L4-5;第4周各取实验组进行HE染色和免疫荧光观察;第48周实验组和对照组Ⅱ型胶原免疫组化染色观察。结果HE染色可见BMSC在椎间盘组织中分部均匀,海藻酸蓝染;第48周各取椎间盘组织切片进行免疫组化,实验组较对照组Ⅱ型胶原表达明显,有明显差异。细胞存活好,红色荧光较烈。结论:采用腺病毒介导SOX9基因转染MSCs能获得较稳定的表达,过表达的SOX9基因诱导BMSC向软骨特征分化,增加人工髓核的含水量,一定程度上逆转了椎间盘的退变。
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