【摘 要】
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本研究以罗非鱼(Oreochromis spp)鱼皮为原料,通过酸法制备得到高纯度的胶原蛋白.利用南美白对虾(Litopenaeus vannamei)虾头肝胰腺中纯化的低温活性胰蛋白酶,对罗非鱼鱼皮胶原蛋白进行定向酶解,以酶解产物分子量及ACE抑制活性为考察指标,对其制备工艺参数进行单因素优化.优化获得酶解的最佳工艺参数为：加酶量17,000 U/g,酶解时间90 min,酶解温度40℃,pH值
【机 构】
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集美大学,食品与生物工程学院 集美大学,食品与生物工程学院;水产品深加工技术国家地方联合工程研究中
【出 处】
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2016年中国水产学会水产品加工与综合利用分会学术年会
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本研究以罗非鱼(Oreochromis spp)鱼皮为原料,通过酸法制备得到高纯度的胶原蛋白.利用南美白对虾(Litopenaeus vannamei)虾头肝胰腺中纯化的低温活性胰蛋白酶,对罗非鱼鱼皮胶原蛋白进行定向酶解,以酶解产物分子量及ACE抑制活性为考察指标,对其制备工艺参数进行单因素优化.优化获得酶解的最佳工艺参数为：加酶量17,000 U/g,酶解时间90 min,酶解温度40℃,pH值8.0.采用SP-Sepharose阳离子交换柱层析,SephadexG-15凝胶柱层析和反相高效液相色谱,从该酶解产物中分离纯化获得高纯度的ACE抑制肽.经MALDI-TOF/TOF-MS/MS分析确定其氨基酸序列为NPARTCR,抑制活性IC50值为50.2μg/mL.用脯氨酸内肽酶对该七肽进行酶解,制备获得更高ACE抑制活性的五肽AR℃R,其ACE抑制活性IC50值为46.7 μg/mL.利用Lineweaver-Burk双倒数作图法对两种ACE抑制肽的抑制模式进行研究,NPARTCR和ARTCR对ACE酶均表现为非竞争性抑制作用.本研究结果表明,南美白对虾和罗非鱼加工副产物制备获得胶原蛋白ACE抑制肽在功能性食品的开发利用方面具有广阔的应用前景.
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