【摘 要】
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目的 探讨紫外线B(UVB)对HLE B-3细胞Ca2+-ATP酶基因和蛋白表达影响及对细胞内Ca2+水平的调节,阐明UVB诱发HLEB-3细胞凋亡的作用机理。 方法 MTT法检测UVB对HLE B-3细胞生长的影响；流式细胞仪检测UVB对线粒体膜电位(ΔΨm)以及细胞内活性氧(ROS)的影响；化学比色法检测过氧化氢、羟自由基和Ca2+-ATP酶活性变化；DAPI及Annexin V-FITC/P
【机 构】
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山东中医药大学眼科研究所 山东中医药大学附属眼科医院
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目的 探讨紫外线B(UVB)对HLE B-3细胞Ca2+-ATP酶基因和蛋白表达影响及对细胞内Ca2+水平的调节,阐明UVB诱发HLEB-3细胞凋亡的作用机理。 方法 MTT法检测UVB对HLE B-3细胞生长的影响；流式细胞仪检测UVB对线粒体膜电位(ΔΨm)以及细胞内活性氧(ROS)的影响；化学比色法检测过氧化氢、羟自由基和Ca2+-ATP酶活性变化；DAPI及Annexin V-FITC/PI染色检测UVB对细胞凋亡的影响；Fluo-3/AM染色检测细胞内Ca2+浓度的变化；实时荧光定量PCR观察UVB对细胞质膜钙ATP酶(PMCA)1,PMCA2,PMCA3在mRNA水平影响；ELISA及Western blot分别检测PMCA1及PMCA在蛋白质水平表达的变化。
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