【摘 要】
：
本研究选取牛分枝杆菌pncA基因、结核分枝杆菌mpt40特异序列，作为基因芯片检测的靶片段，设计和筛选特异引物及探针.将标记的探针点至醛基化基片，制备基因芯片.采用引物不对称比例PCR技术扩增目的片段，然后将单链扩增产物与芯片杂交，杂交信号经扫描仪扫描后进行数据判读，并对采自不同牛场的5 36份临床样本进行检测. 实验结果表明：所建立的基因芯片方法能够同时对牛分支杆菌及结核分枝杆菌进行检测，其检测
【机 构】
：
华南农业大学兽医学院,广州 广东 510642 广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心,广州 广东
【出 处】
：
中国畜牧兽医学会2010学术年会暨第二届中国兽医临床大会
论文部分内容阅读
本研究选取牛分枝杆菌pncA基因、结核分枝杆菌mpt40特异序列，作为基因芯片检测的靶片段，设计和筛选特异引物及探针.将标记的探针点至醛基化基片，制备基因芯片.采用引物不对称比例PCR技术扩增目的片段，然后将单链扩增产物与芯片杂交，杂交信号经扫描仪扫描后进行数据判读，并对采自不同牛场的5 36份临床样本进行检测. 实验结果表明：所建立的基因芯片方法能够同时对牛分支杆菌及结核分枝杆菌进行检测，其检测灵敏度为50fg(fivetubercle bacilli.).对临床常见其它的菌群无特异反应.临床样本检测中，检出牛分枝杆菌阳性样本16份，结核分枝杆菌阳性样本2份，混合感染样本4份.该方法的建立有望为进出境动物疫病快速、高通量基因芯片检测技术的建立奠定基础，具有广阔的应用前景.
其他文献
为了观察隐性乳房炎奶牛泌乳期乳腺上皮细胞bax凋亡因子的表达，对隐性乳房炎发病的机制和治疗提供科学参考依据.本试验经鉴定筛选取18头产能相似的患有隐性乳房炎的黑白花奶牛，分别在未妊娠、分娩后第8天，20天，120天，240天，300天采取乳腺组织，应用免疫组化方法检测凋亡因子bax的表达.试验结果说明：免疫组织化学检测乳腺腺泡上皮细胞显示，凋亡因子bax在未妊娠期阳性率最高，分娩之后逐渐下调，盛乳
目的:了解不同电针频率对山羊中枢脑啡肽表达水平的影响.方法:35只成年杂交公山羊，体重23-27kg，随机分为对照组(0 Hz)，2 Hz电针组、40 Hz电针组、60 Hz电针组、100 Hz电针组，电针组山羊采用“百会-鬟甲”，“耳根-三阳络”组穴连续电针刺激30 min，电针结束后灌流固定并取脑，制作石蜡切片，采用SABC免疫组化法测定山羊中枢各镇痛核团内脑啡肤表达水平.结果:所有电针组伏核
目的：本研究旨在通过对病死犊牛呼吸道内支原体进行分离鉴定，探讨犊牛支原体感染的主要种类及原因.方法：选取病死犊牛20头，通过血液中支原体检测、支原体液体培养基检验、固体培养基分离培养，及套式PCR反应等方法，检测呼吸道内支原体感染情况，并确定支原体种类.结果:病死犊牛呼吸道内支原体检出率为70％，其中45％有细胞内感染发生;分离到的支原体经鉴定为解脲支原体、精氨酸支原体和人型支原体.结论:结果提示
@@绵羊朊蛋白基因单核苷酸的多态性与羊痒病潜伏期、易感性、种间屏障有关，尤其在136,154和171位点的多态性与自然痒病和BSE的易感性有很大的关系。但是该基因的基因型并不能解释所有的痒病阳性病例，表明，还有其他的基因影响疾病的发生。
本研究根据牛轮状病毒(Bovino rotavirus，BRV)的NSP4基因序列，设计并构建了shRNA重组慢病毒载体RNAi-H1-89，利用脂质体介导法，将RNAi-H1-89与辅助质粒共转染293细胞，包装shRNA重组慢病毒;重组慢病毒感染MA104细胞24h后继续接种BRV，以针对LacZ基因的shRNA重组慢病毒为对照，48h后与LacZ shRNA对照比较，RNAi-H1-89明显
根据已发表的山羊痘病毒P32基因序列设计合成一对带有BamH Ⅰ和HindⅢ点的引物，用PCR方法从分离贵州LD毒株中扩增出含P32基因的DNA序列，纯化后，经BamH Ⅰ/HindⅢ双酶切，克隆至真核表达载体peDNA3.1(+)，获得peDNA3.1(+)-P32/LD重组栽体.通过PCR和双酶切鉴定，证实了重组真核表达裁体peDNA3.1(+)-P32/LD的成功构建.为山羊痘基因工程疫苗的
鉴于传统检测方法的诸多缺点，为了深入研究山羊痘病毒(GPV)，利用DNAStar分析了GenBank中所有7株羊痘病毒全基因序列，选取位于山羊痘病毒(AY077835)基因组gp064区域约64bp的基因片段，设计并合成了一对PCR引物和一条TaqMan-MGB探针，建立了FQ-PCR和标准曲线，并利用该方法对山羊痘临床皮肤痘疹材料和人工感染动物材料进行GPV核酸检测.结果表明，构建的PQ-PCR
利用随机引物AP-7，建立引物随机多态性扩增(RAPD)体系对71株引起内蒙古和贵州两地区奶牛乳房炎的金黄色葡萄球菌分离株进行基因分型研究.结果表明，71株金黄色葡萄球菌均得到清晰的RAPD指纹图谱，扩增产物在2-9条带之间，产物大小在240-4500 bp之问.菌株共分为6个基因型，其中I型17株(23.9％)，Ⅱ型3株(4.2％)、Ⅲ型33株(46.5％)Ⅳ型15株(21.1％)，V型2株(2
目的:探索血清中皮质醇浓度变化与奶牛酮病的关系，开展相关奶牛酮病的调控研究.方法:分别对22头妊娠期奶牛进行临床检测，根据其临床检测水平分为亚临床症状奶牛(A组)、患病奶牛(B组)和健康奶牛(C组).试验中，采集分娩前第3天(-3 d)、分娩时(0 d)、分娩后第3天(3d)、笫7天(7 d)血液，分离血清，采用全自动生化分析仪、血糖分析仪检测血清中的β-羟丁酸(血酮)、皮质醇(COR)，促肾上腺
@@2009年4月13日，我苏木格丁嘎查牧民道某某来给我站来电话称报称其羊急性死亡，请速派人去救治。笔者随其来到70公里外的家中，进行了诊断，现将有关情况报告如下。