猪的5种病毒性疾病病原体单克隆抗体制备

来源 :中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第四次猪病学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhangfegnlin
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@@口蹄疫病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒(又称蓝耳病)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪细小病毒和猪的伪狂犬病毒是威胁养猪业最严重的病毒性疾病病原体。近几年,猪的病毒性疾病在全国范围内流行严重,给我国的养猪业生产造成了巨大的损失,其病原体检测和抗体监测是各级动物疾病预防机构最重要的工作。
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流行性乙型脑炎病毒(Japanese encephaIitis virus,JEV)是一种严重危害人畜健康的虫媒病毒。表面囊膜蛋白(E蛋白)是该病毒的主要结构蛋白。本研究利用原核表达的乙型脑炎病毒AA14-14-2株结构蛋白E蛋白作为免疫原,免疫6周龄BALB/c小鼠,采用淋巴细胞杂交瘤技术进行融合,经有限稀释法获得1株特异性针对JEVE蛋白的杂交瘤细胞,命名为5D4,经测定5D4单抗亚类属于Ig
甲型H1N1流感病毒给人类带来极大地恐慌,而HA蛋白作为流感病毒重要的表面抗原,在产生抗体方面扮演重要角色。本研究通过原核表达系统表达甲型H1N1流感病毒HA蛋白,并经过Ni-NTA His Bind柱进行纯化,获得较高纯度的蛋白。该蛋白的获得,为建立甲型H1N1流感病毒检测技术奠定基础.
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根据GenBank中登录的新型猪细小病毒(PPV4)全基因组序列,针对结构蛋白VP2基因序列设计合成特异性引物及TaqMan探针,以VP2克隆质粒为标准品,通过对探针浓度、引物浓度、dNTP浓度、镁离子浓度以及退火温度进行调整,建立了用于检测PPV4的TaqMan荧光定量PCR。结果显示,该方法在6.73×107copies/μL-6.73×102copies/μL范围内线性关系良好,相关系数为0
A型流感病毒感染是人和多种动物呼吸系统疾病的主要原因,然而不管是IAV引起的季节性流感暴发还是周期性的全球流感大流行,主要归因于IAV逃避宿主免疫反应的策略。越来越多的证据表明IAV已经进化出高超的策略克服宿主的抗病毒信号,如抗原变异和编码辅助蛋白(NS1和PB1-F2)。深入理解IAV逃避宿主免疫的策略,有助于揭示IAV感染的机制和发现针对IAV的抗病毒药物的靶标.因此,本文综述了IAV逃避抗病
参考GerBank中发表的PRV OSU毒株VP7基因核苷酸序列ORF两端保守区序列,设计1对特异引物,以PRV GDXS株反转录CDNA为模板,通过PCR方法扩增出长约1kb的基因片段,并克隆到pMD18-T载体中进行序列测定。测序结果表明:GDXS RV的VP7基因全长1062bp,含有一个981bp的开放阅读框,编码326个氨基酸。与国内外已知的15个毒株VP7全长基因的核苷酸及推导的氨基酸
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应用PCR方法,从郑州、福建、浙江金华和宁波猪肺脏中分别扩增出四段PCMV gB基因,并将其分别克隆入pMD18-T载体,经蓝白斑筛选和PCR鉴定,将阳性克隆进行序列分析并构建系统进化树。序列分析表明,其gB基因全长为2580bp,编码860个氨基酸,与PCMV其他序列相比,其同源性在96.1%~99.7%,与β疱疹病毒亚科中其他常见毒株同源性在25.9%-38.1%;推导的氨基酸序列,有11个半