【背景】食用菌的菌种培养基对于科学研究及保藏菌种具有重要意义,也是栽培生产上高产稳产的关键。海藻糖作为一种稳定的非还原性二糖,具有防止蛋白质变性的作用,而且海藻糖积累到一定水平会响应于高温、碳氮饥饿、氧自由基、脱水、冷胁迫等引发的胁迫性应激。大球盖菇和斑玉蕈是食药兼用且具有开发潜力的珍稀食用菌,培养基对菌丝生长及子实体发育具有重要作用,优化培养基显得尤为重要。【目的】筛选出最适合培养大球盖菇、斑玉蕈的新型培养基。【方法】使用添加海藻糖的新型培养基,对不同培养基培养的大球盖菇及斑玉蕈菌株的菌丝生长状况、生长速度和生物量及纤维素酶、漆酶活性进行测定与分析。【结果】相较于PDA培养基,添加海藻糖的培养基能够提高菌丝生长速度、增加生物量,海藻糖添加的比例对纤维素酶和漆酶的影响较大,对大球盖菇及斑玉蕈菌丝的生长产生显著的促进作用,但不会改变其蛋白质的组成。【结论】大球盖菇最适合选用PTA-5培养基,斑玉蕈的最佳培养基是PDTA培养基。添加海藻糖的培养基不仅能为大球盖菇、斑玉蕈菌丝生长提供良好的营养和环境,显著加快两种食用菌菌丝的生长速度,提高其菌丝生物量,可能增强大球盖菇、斑玉蕈在培养过程中应对环境胁迫的能力,而且制作方法简单,具有间接增加经济效益的潜力。