【摘 要】
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目的:miR-138在人类头颈部鳞癌等多种肿瘤中低表达,与肿瘤细胞的侵袭转移能力负相关.本研究旨在探讨miR-138是否可通过调控EMT参与肿瘤侵袭转移及其具体的作用机制.方法:通过高通量芯片和生物信息学分析,筛选出与EMT调控相关的潜在miR-138靶基因;luciferase报告基因分析证实这些候选靶基因与miR-138之间存在直接的结合序列;改变细胞内miR138与EMT调控相关靶基因的表达
【机 构】
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中山大学光华口腔医学院附属口腔医院口腔颌面外科 Center for Molecular Biol
【出 处】
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2013国际暨全国第十二届头颈肿瘤学术大会
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目的:miR-138在人类头颈部鳞癌等多种肿瘤中低表达,与肿瘤细胞的侵袭转移能力负相关.本研究旨在探讨miR-138是否可通过调控EMT参与肿瘤侵袭转移及其具体的作用机制.
方法:通过高通量芯片和生物信息学分析,筛选出与EMT调控相关的潜在miR-138靶基因;luciferase报告基因分析证实这些候选靶基因与miR-138之间存在直接的结合序列;改变细胞内miR138与EMT调控相关靶基因的表达水平,Western blot、间接免疫荧光和qRT-PCR检测靶基因/蛋白与miR-138的表达情况;细胞侵袭、迁移实验观察其对细胞表型的影响.
结果:成功筛选获得一批EMT调控相关的潜在miR-138靶基因,包括VIM、ZEB2和EZH2. luciferase报告基因分析证实这些基因序列上均存在2-3个miR-138核心序列的互补结合位点;miR-138可直接与这些序列互补结合,抑制靶基因的表达;功能性实验表明,增加miR-138表达水平,细胞内VIM、ZEB2和EZH2的表达显著降低,E-cad表达水平升高,伴随有细胞的侵袭、迁移能力明显下降;反之亦然.
结论:miR-138可以通过作用多个基因,从不同水平上功能性调控EMT,参与头颈部鳞癌的发生与发展.
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