桂花遗传转化条件初探

来源 :2016年中国观赏园艺学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:nonstop_ma
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本研究以结实桂花(Osmanthus fragrans Lour.)早期子叶期的未成熟合子胚为外植体材料,在MS+0.5mg·L-12,4-D+1.0mg·L-16-BA初始培养基上暗培养30天后诱导得到的胚性愈伤组织作为遗传转化的受体,利用根癌农杆菌介导的方法,通过对不同的侵染及培养条件的摸索,初步探索了桂花的遗传转化体系的条件.结果表明,桂花胚性愈伤组织的卡那霉素的选择敏感性浓度为200mg·L-1,头孢霉素浓度为300mg·L-1.GUS瞬时表达表明最优的转化条件为:农杆菌菌株为EHA105时,侵染菌液浓度为0.6,侵染时间为20min,共培养天数为2d,共培养时培养基中添加100μM AS时效率最高.选择培养基为MS+0.5ag·L-1NAA+1.0mg·L-1BA+200mg·L-1Km+300mg·L-1Cef.下一步将继续优化选择培养基抗生素的种类和浓度,解决反菌问题,以获得完整转化植株.
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