【摘 要】
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本文通过对鸡的试验研究，结果表明(1)同一时期的鸡生殖细胞用二酶二步(胶原酶I、胰酶)消化法分离提取细胞的效果显著优于胶原酶I或胰酶，且二酶二步(胶原酶I、胰酶)消化法分离获得的鸡生殖细胞的细胞活率在95％左右。(2)不同时期的鸡生殖细胞，孵化15d的分离效果显著优于孵化20d和出壳8d的。(3)生殖细胞在缺乏支持细胞作为饲养层的情况下不易贴壁，且即使贴壁其在体外存活的时间也很短;有支持细胞贴壁生
【机 构】
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山西农业大学生命科学院,山西太谷030801 山西农业大学动物科技学院,山西太谷030801
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本文通过对鸡的试验研究，结果表明(1)同一时期的鸡生殖细胞用二酶二步(胶原酶I、胰酶)消化法分离提取细胞的效果显著优于胶原酶I或胰酶，且二酶二步(胶原酶I、胰酶)消化法分离获得的鸡生殖细胞的细胞活率在95％左右。(2)不同时期的鸡生殖细胞，孵化15d的分离效果显著优于孵化20d和出壳8d的。(3)生殖细胞在缺乏支持细胞作为饲养层的情况下不易贴壁，且即使贴壁其在体外存活的时间也很短;有支持细胞贴壁生长的生殖细胞极易附于支持细胞，生长良好，存活时间长。(4)用GFP慢病毒表达质粒与辅助质粒共转染293t细胞生产慢病毒颗粒，病毒滴度为6.084×107TU/mL。(5)用GFP慢病毒转染原代培养的鸡生殖细胞，提取细胞RNA，反转录为cDNA后做RT-PCR检测到目的基因GFP的表达量为0.84*lO2copy/ugRNA。本试验结果说明孵化15d的鸡胚因其精原细胞刚刚形成，细胞活力强，因此分离效果与细胞活率较高。
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本研究通过对PPARγ基因启动子区翻译起始位点上游一段长度为875bp(-1085-211)的序列进行甲基化分析，结果表明:该区域一共包括6个CpG位点，分别位于翻译起始位点上游一927,-709,-537,-460,-348和一296bp处。在高、低脂系肉鸡中，该区域DNA甲基化总体水平随着周龄增加而下降，并且三个周龄低脂系肉鸡的甲基化水平均显著高于高脂系肉鸡(P＜0.05 )。其中一460,-
本文以黑羽番鸭为素材，进行试验研究，在7对引物的检测结果中发现2对引物(暂命名为引物3、引物7)的扩增片段中存在多态。引物3扩增产物检测显示3种基因型，分别定义为EE,FF,EF，序列比较发现在第3内含子第4位点存在A-G突变。FF型基因型频率最高为0.3818 , EF型次之为0.3455 , EE型最低为0.27270F等位基因频率比E等位基因频率高0.1090。引物7扩增产物检测显示3种基因
本文通过对朗德鹅的试验研究，扩增获得的HNF4α基因序列包括完整的1371bpCDS区，与人、大鼠、小鼠、猪、牛、绵羊和原鸡的同源性分别为:79.14％-95.09％0HNF4α基因共编码456个氨基酸，为亲水性蛋白，二级结构分析其具有a螺旋(197个AA ,43.20％)、延长片段(35个AA,7.68％)和无规卷曲(224个AA,49.12％)三种结构，存在26个磷酸化位点，分别在Ser(15
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