套式聚合酶链反应快速检测人类唾液中变形链球菌和茸毛链球菌

来源 :2001年全国涎腺疾病学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sarnimoon
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龋病是一种细菌感染性疾病.大量研究表明,在变形链球菌组中变形链球菌和茸毛链球菌为人类的主要致病菌.长期以来,变链菌倍受关注.但近来的一些研究表明,茸毛链球菌与变链相比,可能具有更强的致龋潜力,对龋病的发生和活跃性可能更为重要.也有学者持不同意见.因此,鉴定变链菌和茸毛链球菌,研究人类口腔中这两种细菌检出率的差异,将对探索哪种细菌与龋病的发生关系更为密切,从而预测和防止龋病的发生有非常重要的意义.以往的区分和鉴定变形链球菌和茸毛链球菌的方法包括:在轻唾培养基上观察菌落形态、生化鉴定、免疫血清学鉴定、DNA探针等方法.但这些方法存在着费时、灵敏度不高等缺点.而聚合酶链反应(polymerase chain reaction,简称PCR)在检验致病菌方面具有简便、省时、灵敏度等优点而倍受欢迎.其中,套式PCR(nested PCR)对应模板的外侧及内侧分别设计内、外两对引物,经过二次PCR放大可将单拷贝的目的DNA片段检出,明显提高PCR检测的灵敏度和特异性.另外,近年来研究证明可通过检测唾液中致龋微生物水平,来反映口腔中致龋微生物的感染水平,并认为唾液样本适合于致龋微生物的定量检测.本项研究运用套式PCR技术,检测人类唾液中变形链球菌和茸毛链球菌,旨在探求一种适合于临床应用的、快速敏感的致龋微生物检测方法。
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