茄科青枯菌(Ralstonia solanacearum)是最具毁灭性的植物病原细菌之一,该病原菌可以侵染54个科450多种植物引起青枯病。不同来源的青枯菌对不同寄主植物的致病性不同。青枯菌致病性和寄主特异性主要通过青枯菌基因调控网络来实现的,其中Ⅲ型分泌系统及其分泌的效应蛋白与青枯菌致病性密切相关。hrpB基因不仅调控Ⅲ型分泌系统组成基因以及多种效应子基因的表达,而且控制依赖于Ⅲ分泌系统输出途径相关基因的表达。因此,hrPB对青枯菌的致病性有重要影响。茄科青枯菌4号生理小种引起姜瘟和沙姜瘟是广东及华南地区重要病害,每年均有不同程度的发生与为害。本研究以茄科青枯菌沙姜菌株YC45(Race 4,BiovarⅣ)为对象,通过PCR扩增YC45hrpB基因ORF上下游500 bp序列,以庆大霉素抗性基因为标记基因,将hrpB基因上游和下游片段,以及庆大霉素抗性基因,按照上游-庆大霉素-下游的顺序依次连接到pK18mobsacB载体中,通过酶切鉴定获得重组自杀质粒pK18-hrPB-Gm质粒。将重组自杀质粒pK18-hrpB-Gm质粒电击转化YC45菌株,通过三步筛选法最终获得突变菌株YC45-ΔhrpBGm,为下一步研究沙姜青枯病菌YC45的致病性、效应子及寄主特异性等奠定了基础。