以CotB作为融合基序在枯草杆菌芽孢表面展示鸡白痢沙门氏菌OmpC的研究

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本文旨在通过使用枯草芽孢杆菌芽孢衣壳蛋白CotB作为融合基序,构建表面展示鸡白痢沙门氏菌外膜蛋白OmpC的重组芽孢,为防控沙门氏菌感染提供新的思路。分别PCR扩增鸡白痢沙门氏菌OmpC编码基因与含自身启动子的芽孢衣壳蛋白CotB编码基因,以质粒pDG364为基础进行二者融合并构建整合型重组质粒pDG364-cotB-ompC,将融合基因整合于枯草芽孢杆菌168 amyE基因位点,通过淀粉酶活性、PCR技术、免疫荧光显微镜进行分析。以芽孢衣壳蛋白CotB为融合基序,成功构建获得携带CotB和OmpC融合基因的整合型重组质粒pDG364-cotB-ompC,并经同源双交叉重组将其整合于枯草芽孢杆菌168基因组上,通过淀粉酶活性分析与PCR鉴定表明该融合基因成功整合于amyE基因位点,使用OmpC特异性抗体探测的免疫荧光显微镜分析检测到特异性的荧光信号。结果表明,鸡白痢沙门氏菌OmpC以具有生物活性的形式成功表达并展示于枯草芽孢杆菌168芽孢表面。
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