论文部分内容阅读
目的探讨亚砷酸钠（NaAsO2）暴露对小鼠骨髓间充质干细胞（Bone marrow mesenchymal stem cells,BM-MSCs）细胞毒性以及分化潜能的影响与机制。方法体外分离小鼠骨髓间充质干细胞,于含有5%CO2、5%O2的培养箱中培养。分别以0.5μmol/L至50.0μmol/L亚砷酸钠对骨髓间充质干细胞进行处理,24h后以CCK8法检测细胞活力;分别以1.0μmol/L、5.0μmol/L和10.0μmol/L亚砷酸钠对骨髓间充质干细胞进行处理,24 h后,以流式细胞术Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡情况、PI单染法检测细胞周期情况、多色标记法检测细胞表面分子CD11b、CD19、CD45、CD29、CD44以及Sca-1表达情况,以实时荧光定量PCR法检测细胞氧化胁迫相关基因mRNA表达水平;分别以1μmol/L、2μmol/L和3μmol/L亚砷酸钠对骨髓间充质干细胞脂肪分化进行处理。7天后,以油红染色法检测细胞脂肪分化能力,以实时荧光定量PCR法检测细胞脂肪分化相关基因mRNA表达水平。结果亚砷酸钠具有小鼠骨髓间充质干细胞细胞毒性;随着亚砷酸钠剂量增加,凋亡细胞增多,细胞周期停滞于G1期,细胞氧化胁迫相关基因Nrf2、Ho-1、Nqo1、Gclc和Gclm mRNA表达增加（p<0.05）,细胞表面分子表达无显著改变;低剂量亚砷酸钠暴露下,细胞脂肪分化能力受损,脂肪分化相关基因Pparγ1、Pparγ2、Cebpα、Cebpβ和Adiponectin mRNA表达降低（p<0.05）。结论亚砷酸钠暴露诱导小鼠骨髓间充质干细胞细胞毒性、凋亡增加、细胞周期阻滞、氧化胁迫以及抑制细胞脂肪分化,但不改变细胞表面分子表达。