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采用酶标单克隆抗体竞争抑制试验对４株抗金黄色葡萄球菌肠毒素（ＳＥＢ）单克隆抗体识别的表位进行了鉴定。结果表明这４株单抗均识别ＳＥＢ上的不同表位。在此基础上，选择不同表位的单克隆抗体用于建立快速双单克隆抗体夹心ＥＬＩＳＡ法检测ＳＥＢ。其中２Ｂ〈，１〉、２Ｂ〈，２〉为包被抗体，１Ｇ〈，４〉－ＨＲＰ为酶标抗体，这种组合检测ＳＥＢ的灵敏度可达到０．１ｎｇ／ｍｌ，而且检测时间大大缩短，只需２ｈ（包含包被及封闭时间）即可完成该实验。ＳＥＢ浓度在１￣３０ｎｇ／ｍｌ时，ＯＤ值和浓度呈直线相关，相关系数为０．９８６。人工样品检测回收率达到９４．４１℅，证明该法灵敏、准确、快速。