【摘 要】
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以鹅坦布苏病毒JS804毒株制备的多克隆抗体为捕获抗体,抗鹅坦布苏病毒NS1蛋白的单克隆抗体4A9作为检测抗体,建立了检测坦布苏病毒的双抗体夹心ELISA方法.该方法的最佳反应条
【机 构】
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南京农业大学动物医学院,江苏南京210095
【出 处】
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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会
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以鹅坦布苏病毒JS804毒株制备的多克隆抗体为捕获抗体,抗鹅坦布苏病毒NS1蛋白的单克隆抗体4A9作为检测抗体,建立了检测坦布苏病毒的双抗体夹心ELISA方法.该方法的最佳反应条件为:兔抗鹅坦布苏病毒多克隆抗体的最适稀释度为1∶1600,单克隆抗体的最适稀释度为1∶160,样品反应时间为1h,酶标羊抗鼠二抗工作浓度为1∶5000,以OD450nm≥0.245作为阳性判定标准.该方法的板间、板内重复性变异系数小于10％,病毒最低检测量为386.25 TCID50/0.1 mL,与NDV、AIV、IBV、DHV和GPV无交叉反应.应用该方法与RT-PCR方法同时检测22份临床样品,符合率达到86.36％.结果表明,建立的双抗体夹心ELISA方法具有特异性好、灵敏性高和重复性好等优点,可用于坦布苏病毒的快速检测.
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