【摘 要】
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目的：为了构建编码人内皮抑素/人血清白蛋白的重组表达质粒，并在毕赤酵母(Pichia pastoris)中获得高效表达。方法：通过重叠延伸PCR的方法，将ES和HSA两片断连接，并将其克隆入pGEM-T载体中，测序正确后，将其克隆至酵母表达载体pPIC9中，然后将鉴定正确的重组表达载体pPIC9-ES/HSA线性化后转化入GS115宿主菌。采用原位双膜法筛选表达株，并将其进行PCR鉴定后扩大培养，
【机 构】
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军事医学科学院野战输血研究所，北京 100850 解放军后勤指挥学院 军事医学科学院野战输血研究所
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目的：为了构建编码人内皮抑素/人血清白蛋白的重组表达质粒，并在毕赤酵母(Pichia pastoris)中获得高效表达。
方法：通过重叠延伸PCR的方法，将ES和HSA两片断连接，并将其克隆入pGEM-T载体中，测序正确后，将其克隆至酵母表达载体pPIC9中，然后将鉴定正确的重组表达载体pPIC9-ES/HSA线性化后转化入GS115宿主菌。采用原位双膜法筛选表达株，并将其进行PCR鉴定后扩大培养，获得的含融合蛋白的培养液盐析后经阳离子交换层析、阴离子交换层析和亲和层析纯化，采用MTT法测定融合蛋白中内皮抑素的活性。
结果：成功构建了人内皮抑素/人血清白蛋白的重组表达质粒pPIC9-ES/HSA，并筛选到表达较为理想的重组菌株pPIC9-ES/HSA-GS115，经甲醇诱导表达后纯化，融合蛋白的纯度达到92％以上，并具有抑制人血管内皮细胞系ECV-304细胞的增殖活性。
结论：成功获得了具有人内皮抑素生物活性的重组人内皮抑素/人血清白蛋白融合蛋白，该研究结果未见文献报道。
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目的：探讨消渴肾宝汤治疗气阴两虚夹瘀型Ⅲ、Ⅳ期糖尿病肾病的疗效。方法：将入选患者分为A(治疗组)、B(对照组)，两组患者均接受糖尿病教育,采用低盐低脂优质低蛋白饮食,选用瑞格列奈或注射胰岛素来控制血糖,及相同的降压、调脂治疗方案。A(治疗组)在常规多因素西药强化治疗的基础上,加用消渴肾宝汤进行中西医结合治疗。结果：治疗组总有效率为91.80％,明显高于对照组的81.25％；治疗组的治疗后肾脏功能、
目的：观察中医补肾活血法对糖尿病周围神经病变(DPN)的临床疗效.方法：将符合标准的DPN病人60例,随机分为治疗组(30例)和对照组(30例),在基础治疗的同时,治疗组予具有补肾活血疗效的中药汤剂治疗;对照组予口服弥可保(甲钴胺)治疗.对病人的症状、神经病变积分、及肌电图进行了观察.结果：治疗组的总有效率为86.21％,对照组的总有效率为60.71％.经Ridit检验显示治疗组明显优于对照组(P
目的：评价丹红注射液治疗2型糖尿病周围神经病变的疗效及安全性.方法：河南中医学院内分泌科2007年3月至2009年6月住院的63例2型糖尿病周围神经病变患者入选本研究.并随机进入对照组(33例)和治疗组(30例).两组病例都用弥可保进行基础治疗,治疗组在观察组基础上用丹红注射液每天一次静脉滴注,观察15天.结果：治疗组1例用丹红注射液后出现皮疹和瘙痒,停药后消失,经15天治疗后,两组的神经症状TS
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糖尿病周围神经病变(DPN)是糖尿病常见的慢性并发症之一,也是导致糖尿病肢端坏疽发生的重要原因。DPN的发病率占糖尿病患者的60％～90％。由于其病因、病理尚未完全阐明,因此西医对本病的治疗,常在控制血糖的基础上,采用B族维生素、血管扩张剂、镇痛药及抗氧化、补充神经营养因子等进行治疗,效果不甚理想。中医对本病采取综合治疗方案,中药内服与外治相结合,在改善临床症状及体征,提高神经传导速度(NCV)等
本文就中医对糖尿病骨质疏松症的病名、消渴兼证“骨痿”的病因病机、辨证分型研究、以及中医治疗消渴兼证“骨痿”的研究做一探讨。
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