【摘 要】
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Brucella is one of the most important zoonotic bacterial pathogen for ruminants.VirB12,a gene adjacent to the virB operon,has been shown to encode an antigen that could be used biomarker for serologic
【机 构】
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Key Laboratory of Zoonotic of Liaoning Province,College of Animal Science and Veterinary Medicine,Sh
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Brucella is one of the most important zoonotic bacterial pathogen for ruminants.VirB12,a gene adjacent to the virB operon,has been shown to encode an antigen that could be used biomarker for serological assays and genetic marked vaccine development.A live attenuated genetic marked vaccine,A19-ΔVirB12,has been developed and showed good protection efficiency and serological differentiation capability in cattle.In this study,a virB12 gene based recombinase polymerase amplification combined with lateral flow strips,termed as RPA-LF-VirB12,was developed to discriminate between infected and A19-ΔVirB12 immunized cattle.The RPA-LF-VirB12 assay was developed and its sensitivity and specificity was evaluated.The RPA-LF-VirB12 could be effectively conducted at 37℃ in 15 minutes.The detection limit was 1fg per microliter and no cross-reactions with other common related bacteria was observed,indicating its good sensitivity and specificity.The RPA-LF-VirB12 assay was applied to detect blood samples from artificially B.abortus 2308 infected and A19-ΔVirB12 immunized cattle.The detection results manifested that with RPA-LF-VirB12 it is feasible to effectively pick out infected cattles.In conclusion,a RPA-LF-VirB12 assay has been developed and provides a rapid and sensitive assay for point-of-care diagnosis of Brucella infection in dairy farms.
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