目的探讨索拉非尼诱导肝癌细胞发生铁死亡的分子机制,阐明ACSL4基因在索拉非尼抗癌效应中的作用。材料和方法①通过使用Z-VAD-FMK,Nercrostain-1,Liproxstatin-1等不同的死亡抑制剂,确定索拉非尼所诱导的细胞死亡形式。②通过生信分析,确定ACSL家族各亚体在原发性肝癌病人肿瘤组织中的表达情况,确定高表达的亚体。③应用siRNA技术构建Huh7细胞株ACSL4敲低模型,使用Crispr Cas9双载体病毒构建Huh7细胞ACSL4敲除的沉默稳转株,通过观察转染后的细胞株在索拉非尼作用下的细胞死亡情况和克隆形成情况,进一步探讨ACSL4蛋白含量对药物诱导的细胞死亡的影响。④检测铁死亡诱导剂Erastin对ACSL4沉默稳转株的影响,探讨ACSL4在细胞铁死亡中与索拉非尼诱导的细胞死亡中发挥作用的一致性。⑤使用BODIPY^TM581/591 C11检测Huh7细胞与ACSL4沉默稳转株在索拉非尼作用下细胞内的脂质过氧化情况,同时检测各细胞内GSH的含量,探究ACSL4对脂质过氧化的影响,以此寻找ACSL4在索拉非尼诱导的铁死亡所发挥的作用机制。结果①铁死亡抑制剂（Liproxstatin-1、Ferristatin-1、GSH-MEE）可以保护索拉非尼诱导的肝癌细胞死亡,而凋亡抑制剂（Z-VAD-FMK）和坏死抑制剂（Nercrostain-1）未有此效果。②比较不同的肝癌细胞株,发现肝癌细胞的ACSL4蛋白表达量与索拉菲尼在该细胞中的IC₅₀呈现显著的反比关系。③在ACSL家族中,ACSL4亚体在原发性肝癌病人肝癌组织中的表达最高。④沉默或敲除抑制ACSL4的表达后,Huh7细胞较为耐受索拉非尼和铁死亡诱导剂导致的死亡。5、与正常Huh7细胞相比,在索拉非尼的作用下,ACSL4沉默细胞的脂质过氧化程度更低。结论①索拉非尼诱导的细胞死亡形式是铁死亡。②抑制ACSL4基因可以降低索拉非尼诱导的脂质过氧化程度,使Huh7细胞耐受铁死亡。