【摘 要】
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酶联免疫吸附测定(ELISA)基于抗原抗体特异性识别作用和酶的生物催化性质,是最常见的免疫分析方法之一[1]。基于贵金属纳米粒子的等离子体性质已经建立了一系列的比色ELISA,
【机 构】
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中国科学院长春应用化学研究所电分析化学国家重点实验室;
【基金项目】
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国家自然科学基金(21435005,21627808);中科院的前沿科学重点项目(QYZDY-SSW-SLH019)的支持
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酶联免疫吸附测定(ELISA)基于抗原抗体特异性识别作用和酶的生物催化性质,是最常见的免疫分析方法之一[1]。基于贵金属纳米粒子的等离子体性质已经建立了一系列的比色ELISA,而荧光ELISA具有更高的灵敏度,其主要基于酶解产物对荧光物质的猝灭或增强作用实现检测[2]。传统的ELISA主要采用碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶作为信号输出酶,而其他的酶由于缺乏商品化的酶-抗体偶联物,较少作为信号输出酶用于ELISA的报道。酪氨酸酶是一种含铜的氧化酶,能够催化单酚衍生物羟基化而生成儿茶酚衍生物,或者进一步氧化儿茶酚衍生物生成邻苯二醌衍生物[3]。基于此,我们尝试建立一个简单地酪氨酸酶引发的原位荧光和比色反应,采用生物素-链霉亲和素体系实现酪氨酸酶和抗体的偶联而进一步信号放大,利用酪氨酸酶作为连接荧光信号和分析物浓度的桥梁,实现用ELISA方法检测肿瘤标志物(图1)。
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