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目的研究 H1-受体拮抗药西替利嗪对肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导人角质形成细胞系—HaCaT 细胞及人真皮成纤维细胞分泌嗜酸粒细胞趋化因子（eotaxin）表达的影响,探讨西替利嗪抗变态反应新的药理作用机制。方法将 HaCaT 细胞和原代培养的人真皮成纤维细胞加以不同刺激因素,对照组无任何刺激因素,模型组给予 TNF-α(500 U·mL-1)刺激,实验组给予 TNF-α(500 U·mL-1) +西替利嗪(1,10,100μg·mL-1)刺激,各刺激因素存在时间均为24 h。采用免疫组织化学法检测 eotaxin 在 HaCaT 细胞和人真皮成纤维细胞中的表达；采用 real-time PCR 半定量法检测 eotaxin mRNA 的表达情况,并采用双脱氧终止法对扩增产物进行基因测序；采用 ELISA 方法检测两种细胞在不同刺激因素下 eotaxin 的分泌数量。结果两种细胞阴性对照组的免疫组化染色切片显示均为弱阳性,加 TNF-α刺激均为强阳性反应。Eotaxin mRNA 的表达(以2-ΔΔCT值计,相对于模型组)如下。HaCaT 细胞：模型组为（4．15±0．23）；对照组设为1．00（P＜0．01）；西替利嗪(1μg·mL-1)组为（0．16±0．01）（P＜ 0．01）；西替利嗪(10μg·mL-1)组为（3．42±0．29）×10-2（P＜0．01）；西替利嗪(100μg·mL-1)组为 （0．65±0．03）×10-2（P＜0．01）。成纤维细胞：模型组为（87．28±3．93）；对照组设为1．00．P＜0．01：西替利嗪(1μg·mL-1)组为（5．01±0．52）×10-2（P＜0．01）；西替利嗪(10μg·mL-1)组为（2．48±0．35） ×10-2（P＜0．01）；西替利嗪(100 μg·mL-1)组为（0．64±0．07）×10-2（P＜0．01）。Eotaxin 蛋白的表达 (浓度单位：pg·mL-1,相对于模型组)：HaCaT 细胞：模型组（692．06±242．28）,对照组（212．71±46． 03）,P＜0．01；西替利嗪(1μg．mL-1)组（710．93±115．58）（P＜0．05）；西替利嗪（10μg·mL.（-1））组（532． 13±58．50）（P＜0．01）；西替利嗪(100μg·mL-1)组（441．52±30．96）（P＜0．01）。成纤维细胞：模型组（34 687．50±1 041．55）,对照组（6 687．15±582．63）（P＜0．01）；西替利嗪(1μg·mL-1)组：（7629． 49±308．63）（P＜0．05）；西替利嗪(10μg·mL-1)组：（7 009．42±204．18）（P＜0．05）；西替利嗪 (100μg·mL-1)组：（5 321．29±427．40）（P＜0．01）。结论从转录和翻译两个水平上证明 TNF-α可以上调 HaCaT 细胞和人真皮成纤维细胞 eotaxin 的表达,并证实了西替利嗪4对 eotaxin 在两种人皮肤组织细胞中表达的抑制作用,且成剂量依赖性。成纤维细胞中 eotaixn 的基础表达量显著高于 HaCaT 细胞,说明成纤维细胞在变态反应性炎症的进程中,对于 eotaxin 诱导的嗜酸粒细胞浸润具有更大的贡献。证实了 eotaxin 是西替利嗪抗变态反应作用又一新的药理作用靶点。