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目的:制备三维天然高分子生物材料海藻酸钠壳聚糖复合凝胶支架,观察实验兔骨髓基质干细胞在支架材料中的黏附生长与成骨活性表达。材料与方法:去离子水溶解海藻酸钠隔夜放置形成3%w/v的海藻酸钠水溶液。以0.1mol/L的NaOH缓慢中和3%w/v的壳聚糖醋酸溶液,得到壳聚糖细颗粒絮状溶胶沉淀,沉淀经清洗离心去除醋酸残余,然后将沉淀加入到海藻酸钠水溶液中,高频震荡混匀使两组分形成复合凝胶。倒置显微镜观察凝胶表面及内部折光变化。复合凝胶冻干后扫描电镜观察液氮冷冻淬断凝胶表面形貌,取部分冻干凝胶研成粉末分别以海藻酸钠和壳聚糖干粉为对照,采用溴化钾压片法进行傅立叶变换红外光谱（FTIR）对比分析。在24孔板放置均匀分切的约0.5-0.6cm3无菌条件制备的复合凝胶块,将兔骨髓基质干细胞（rBMSC）以2×104/孔密度播种在凝胶块中,成骨诱导培养(10-7mol/L的地塞米松,50μg/L的VitC和10mmol/L的β-甘油磷酸)。观察细胞黏附生长并在第9、12天进行复合培养物vonKossa染色。结果:壳聚糖沉淀与海藻酸钠溶液震荡混匀后形成无色半透明的共聚凝胶,复合凝胶置于水溶液中保持稳定的完整性。在位相差倒置显微镜下可以看到纵横交错的条索样凝胶纤维网络。扫描电镜显示冻干凝胶块淬断面中为10-20μm厚不均匀光滑膜片和纤维交织的网状结构,其间有大小不等的间隙。FTIR的峰值分析表明壳聚糖分子链上的氨基和乙酰胺基都与海藻酸钠分子链上的羧酸盐官能团产生静电相互作用。复合凝胶中播种rBMSC2小时后可见黏附轮廓清晰圆形细胞,第3天凝胶表面和内部有密集细胞群落,细胞形态梭型和多角形,vonKossa染色显示凝胶中有较多棕褐色斑点和斑块。结论:海藻酸钠壳聚糖复合凝胶支架材料复合凝胶中结合的rBMSCs在成骨诱导条件下表达了良好成骨活性。