【摘 要】
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本文采用携带NPTⅡ和GUS的双元表达载体(pROA93)的根癌农杆菌菌株EHA101对甘薯主栽品种徐薯18的胚性悬浮细胞进行了遗传转化.结果表明,继代培养3d的胚性悬浮细胞最适合转化;菌液浓度OD600nm=0.1～0.9对遗传转化效率没有明显影响;用0.45mol/L甘露醇预处理胚性悬浮细胞60min可以显著提高转化效率;在共培养培养基中添加20μmol/LAgNO3和100μmol/LAS均
【机 构】
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江苏徐州甘薯研究中心,徐州,221121;中国农业大学农学与生物技术学院,北京,100094 中国
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本文采用携带NPTⅡ和GUS的双元表达载体(pROA93)的根癌农杆菌菌株EHA101对甘薯主栽品种徐薯18的胚性悬浮细胞进行了遗传转化.结果表明,继代培养3d的胚性悬浮细胞最适合转化;菌液浓度OD600nm=0.1～0.9对遗传转化效率没有明显影响;用0.45mol/L甘露醇预处理胚性悬浮细胞60min可以显著提高转化效率;在共培养培养基中添加20μmol/LAgNO3和100μmol/LAS均可以显著提高转化效率;共培养2～4d,转化效率高,并且转化愈伤组织状态好.利用适宜的转化条件转化徐薯18胚性悬浮细胞,GUS瞬时表达率达90.2﹪.
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