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目的:文献报告胶质瘤干祖细胞(glioma stem cells-progenitors,GSCPs)与神经干祖细胞(neural stem cells-progenitors,NSCPs)有共同的自我更新、多向分化之特点。但我们发现两者在向终末方向分化卜却截然不同,本文旨在阐明GSCPs分化走向与NSCPs之间的不同点和分子机制。
方法:用无血清培养法克隆NSCPs和GSCPs,用无血清和含血清两种培养方法以阻止或诱导两者的分化,用不同分化阶段细胞的标志蛋白、超微结构和白噬活性等指标观察两者不同的分化状态。用自噬抑制剂或活化剂对GSPCs进行干预,以观察自噬活性的变化。用氨基酸测序和数据库比对的方法检测与自噬活性相关的抑癌基因PTEN突变。用乏氧培养方法诱导GSCPs向血管内皮细胞转分化。从基因芯片和组织芯片中优选与细胞分化相关的新基因,並用RNA干扰等方法进行功能验证。
结果:GSCPs分化是可逆的而NSCPs是不可逆的。在电镜下,GSCPs的细胞结构比NSCPs更原始,自噬小体的数量明显减少。GSCPs的分化抑制与自噬活性降低有关,而自噬活性的降低与PTEN突变有关。在体外培养,移植瘤组织和临床标本都见到源于GSCPs细胞参与肿瘤血管形成。在基因芯片和组织芯片上采集到了CDC2、ABCG2等基因表达与GSCPs源性肿瘤分化关系密切。
结论:GSCPs虽然具有多向分化潜能,但分化始终被抑制。同胚层逆向分化和跨胚层转分化成血管内皮细胞是其或显或隐的特征。自噬活性降低、PTEN基因突变、CDC2、ABCG2的高表达作为上述特征的分子机制在各自相关层面上发生作用。这一机制非但能保持足够多的GSCPs以保证肿瘤细胞迅速增殖的继代需要,还可自主产生肿瘤血管。