乌塌菜耐抽薹关键基因BcSVP1的功能分析

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乌塌菜(Brassica campestris L. ssp. chinensis var. rosularis),别名塌菜,是白菜亚种的1个变种,在江淮流域秋冬季节广泛栽培。但生产上绝大部分的乌塌菜栽培品种先期抽薹现象较多,严重影响了产量和品质。培育晚抽薹品种是解决这一问题的根本途径。因此,研究乌塌菜耐抽薹调控机理,对解决先期抽薹,开展耐抽薹育种具有非常重要的意义。以乌塌菜耐抽薹特异材料W13-2为试材,利用同源克隆技术获得自主途径与春化途径关键基因SVP-like基因,命名为BcSVP1。十字花科植物同源基因多序列比对发现,该基因含有MADS-box、K-box等保守结构域;进化树分析发现,该基因与芸薹属的大白菜(B. rapa)、油菜(B. napus)和甘蓝(B. oleracea)的亲缘关系最近。将该基因与GFP融合、构建瞬时表达载体并侵染烟草叶片,荧光分析发现该基因主要在细胞核中表达,表明BcSVP1基因与其它MADS-box基因类似,其靶标在细胞核内。为了分析BcSVP1基因对春化作用的应答情况,对乌塌菜萌发种子(24h)和幼苗(30d)进行不同春化时间处理;荧光定量PCR检测BcSVP1基因在子叶、根和叶中的表达情况,发现该基因在这些器官中的表达水平随春化时间延长均呈下降趋势,表明BcSVP1主要通过分生组织和叶片响应春化作用。但在幼苗春化处理14 d时,其表达出现了小峰值,可能是BcSVP1防止植物在短期寒冷条件下过早开花。荧光定量PCR进一步分析BcSVP1在不同组织的表达情况,结果表明,BcSVP1在营养器官中的表达量显著高于生殖器官,在植物维持营养生长方面发挥着重要作用。此外,BcSVP1随花蕾发育,其表达量呈下降趋势,这可能是BcSVP1在花蕾分化中也起到了一定的作用。利用遗传转化技术获得BcSVP1转基因拟南芥植株。与野生型植株相比,35S:BcSVP1转基因植株莲座叶片数显著增多,开花时期显著延迟,并且AtFLC、AtSVP等开花抑制因子表达量显著上调,AtFT、AtSOC1等成花整合因子表达量显著下调,表明BcSVP1作为开花抑制因子发挥作用。此外还发现,35S:BcSVP1转基因植株表现出开花缺陷,同时花发育相关基因AtAP3、AtAGL18和AtAGL104的转录水平也有所升高,表明BcSVP1可能参与花的正常发育。
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