【摘 要】
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本研究探索了一套包括鸡外周血和脾脏T淋巴细胞的分离、纯化和刺激增殖培养的实验方法。脾脏细胞和外周血全细胞通过鸡T淋巴细胞分离液进行初步分离，获得单核免疫细胞，随后采用尼龙毛柱进行二次纯化，获得鸡T淋巴细胞。单独添加PHA,ConA或rchIL2均不能显著增加鸡T淋巴细胞体外增殖能力，rchIL2只有与PHA或ConA结合使用才能产生明显的刺激作用，且在相同rchIL2浓度条件下，ConA共刺激效果
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十九次学术研讨会
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本研究探索了一套包括鸡外周血和脾脏T淋巴细胞的分离、纯化和刺激增殖培养的实验方法。脾脏细胞和外周血全细胞通过鸡T淋巴细胞分离液进行初步分离，获得单核免疫细胞，随后采用尼龙毛柱进行二次纯化，获得鸡T淋巴细胞。单独添加PHA,ConA或rchIL2均不能显著增加鸡T淋巴细胞体外增殖能力，rchIL2只有与PHA或ConA结合使用才能产生明显的刺激作用，且在相同rchIL2浓度条件下，ConA共刺激效果优于PHA。50 ng/μ1 rchlL2,12 g/μ1ConA条件下作用36h，鸡外周血T淋巴细胞体外活力增加为原来的1.8倍，鸡脾脏T淋巴细胞体外活力增加为原来的2.6倍。RPMI-1640培养基中添加10％ FBS,2%鸡血清及上述浓度刺激物，培养温度40℃,5%C02条件下进行T淋巴细胞的培养，T淋巴细胞在体外存活时间长达3周，足以满足一般体外实验。为后期T淋巴细胞的相关研究提供实验基础。
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目的:建立PCV2高灵敏度的快速检测方法，为PCV2的预防提供帮助。方法:根据PCV2 ORF1设计一对特异性引物，建立猪圆环病毒2型SYBR GreenⅠreal time PCR检测方法。结果:该方法灵敏度可达10-100拷贝/μL，比常规PCR检测方法灵敏度高10倍，而与猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪瘟病毒(CSFV)以及猪细小病毒(PPV)没有交叉反应，利
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鸡白痢沙门菌是养鸡业中引起严重危害的细菌之一,能造成巨大的经济损失,为了研制更加安全的鸡白痢沙门氏菌弱毒株,并使其开发为活疫苗载体.本研究以缺失了Crp基因的鸡白痢沙门菌C79-13为受体菌，降低了C79-13的毒力，消除了毒力返强的风险，然后与x7213(pRE4asd)接合转移，成功构建了asd基因突变株，并与含asd基因的质粒PYA3493形成营养互补，用于高效表达外源基因。生物学特性研究表
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