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目的:探讨诱导多能干细胞体内外分化残留特性,评估其作为组织工程种子细胞的致瘤性风险.
方法:小鼠Oct-4-GFP诱导多能干细胞(iPSCs)体外类胚体分化20天或者裸鼠皮下注射6-8周形成畸胎瘤后消化打散,重新给予诱导多能干细胞常规培养液培养.观察类胚体或者畸胎瘤中残留未分化细胞形态;流式细胞仪和免疫荧光检测和观察类胚体和畸胎瘤中残留细胞表面标志物及体内外再次分化能力.将残留细胞扩增后注入裸鼠皮下,6周后取材进行大体观和组织学检测.
结果:体外分化20天的类胚体和体内分化6-8周的畸胎瘤中，始终存在小部分的残留未分化的诱导多能干细胞，这些细胞生长形态呈克隆羊，AKP染色呈阳性，表达Oct-4和SSEA-1。这些残留细胞可以再次体内形成类胚体分化和畸胎瘤，并且可以反复残留。
结论:应用诱导多能干细胞作为组织工程种子细胞具有致瘤性的风险，需要解决其分化残留问题。