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目的双氧化酶1(dual oxidase 1,Duox1),是气道上皮细胞中NADPH氧化酶(NADPH oxidase,Nox)的主要亚型,能够催化其底物产生过氧化氢,引起细胞生理和病理反应,其作用的发挥需结合调节亚基P47(P47phox)等产生生物学效应。由于脂筏在Nox的激活中发挥十分关键的作用,本研究旨在探讨Duox1的激活是否依赖于脂筏聚集并探索其机理。方法与结果通过蔗糖梯度超速离心法从气道上皮细胞中分离出脂筏层,并进行免疫印迹检测发现,与对照组相比,在用肿瘤坏死因子-α(TNF-α)处理细胞后,Duox1和P47phox转移到脂筏层中。共聚焦显微镜下观测到脂筏簇集到细胞膜上,与Duox1和P47phox发生共定位。给予刺激后,细胞内Duox1和P47phox分别与鞘磷脂的水解产物神经酰胺发生了共定位的现象。在给予脂筏干扰剂甲基-β-环糊精(methyl-β-cyclodextrin,M-β-CD)或酸性鞘磷脂酶(acid sphingomyelinase,ASMase)抑制剂地昔帕明(desipramine,DES)后,TNF-α引起的Duox-1和P47phox在细胞膜脂筏区中表达增加的现象被抑制。TNF-α刺激引起的活性氧生成也可以被M-β-CD和DES抑制,促炎核转录因子-κB(nuclearfactor-κB,NF-κB)的活化也能被M-β-CD和DES所抑制。同时,活性氧的产生及NF-κB的激活也能被Duox1或ASM酶特异性小干扰RNA(siRNA)所抑制。结论这些结果显示气道上皮中Duox1介导的氧化还原信号是一个依赖于ASM酶激活产生的神经酰胺导致脂筏簇集的过程。