【摘 要】
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低聚乳果糖（Lactosucrose,LS）是一种不易消化的功能性低聚三糖,具有良好的益生作用。本研究首次从甲醇芽孢杆菌LB-1中获得β-呋喃果糖苷酶,经产酶条件优化及酶的分离纯化后,利用该酶进行低聚乳果糖的生物合成研究。结果表明,在最佳产酶条件（10 g/L葡萄糖,5 g/L酵母提取物,pH 7.0,37℃,24 h）下可从甲醇芽孢杆菌LB-1发酵培养液中获得最大酶活8.63 U/mL。采用硫酸
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低聚乳果糖（Lactosucrose,LS）是一种不易消化的功能性低聚三糖,具有良好的益生作用。本研究首次从甲醇芽孢杆菌LB-1中获得β-呋喃果糖苷酶,经产酶条件优化及酶的分离纯化后,利用该酶进行低聚乳果糖的生物合成研究。结果表明,在最佳产酶条件（10 g/L葡萄糖,5 g/L酵母提取物,pH 7.0,37℃,24 h）下可从甲醇芽孢杆菌LB-1发酵培养液中获得最大酶活8.63 U/mL。采用硫酸铵沉淀和Sephadex G-75凝胶色谱分离纯化技术对发酵液中的β-呋喃果糖苷酶进行分离纯化,纯化倍数为52.93,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳在45kDa处显示出一条明显的蛋白质条带,并将条带切下进行LC-MS鉴定。利用纯化的β-呋喃果糖苷酶进行低聚乳果糖的生物合成,在最佳反应条件（pH 7.0,37℃,加酶量6.0 U/g蔗糖,蔗糖底物15%,乳糖底物15%,28 h）下其产量可高达110 g/L。综上可知,本研究中新微生物来源的β-呋喃果糖苷酶具有较高的转果糖基化活性,在益生元低聚乳果糖的生物合成中具有潜在的应用前景。
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