【摘 要】
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目的：研究成纤维细胞生长因子(FGF)对培养中的大鼠成肌细胞生长及蛋白质代谢的影响,以了解细胞生长因子对成肌细胞的作用机理,探讨该因子对运动损伤治疗的机制.方法：1)大鼠成肌细胞骨胳肌组织细胞的培养、传代、鉴定：从健康的7d龄的SD大鼠后肢肌肉制备数十块1mm3大小组织块,吸取数小块组织置于培养瓶内,注入适宜培养液,然后放入培养箱进行原代培养,成肌细胞用desmin抗体进行免疫酶染色鉴定.2)FG
【机 构】
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山东体育学院,山东济南250102
【出 处】
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2012年中国运动生理生化学术会议
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目的：研究成纤维细胞生长因子(FGF)对培养中的大鼠成肌细胞生长及蛋白质代谢的影响,以了解细胞生长因子对成肌细胞的作用机理,探讨该因子对运动损伤治疗的机制.方法：1)大鼠成肌细胞骨胳肌组织细胞的培养、传代、鉴定：从健康的7d龄的SD大鼠后肢肌肉制备数十块1mm3大小组织块,吸取数小块组织置于培养瓶内,注入适宜培养液,然后放入培养箱进行原代培养,成肌细胞用desmin抗体进行免疫酶染色鉴定.2)FGF对骨胳肌细胞增殖的影响：96孔培养板内准确接种相同数量的细胞.接种密度为8×105cells/ml,设空白组、正常对照组和实验组,正常对照组除不加FGF外,处理与实验组相同,实验组分别加入不同浓度的FGF 50pg/ml、100pg/ml、150pg/ml、200pg/ml、250pg/ml、300pg/ml、350pg/ml,培养48h后计算增殖率.3)FGF维持细胞活性实验(台盼蓝染色法)：按下式计算细胞活力：细胞存活率(％)=(细胞总数-死细胞数)/细胞总数×100％.4)FGF对大鼠成肌细胞蛋白质代谢的影响：将细胞接种于直径为70mm的培养瓶,2ml/皿,培养24h后,加入不同浓度的FGF(浓度设计同细胞增殖实验),药浓为培养基内的实际浓度,再培养48h后用PBS洗一次,加0.1molNaOH溶解(2m/皿),然后用Lowry法进行蛋白定量分析.结果：各实验组细胞增殖率与对照组比较均有显著的统计学差异(P＜0.05),说明FGF具有明显的促进骨胳肌组织细胞增殖的作用,并且这种促增殖作用具有浓度依赖性,但在300pg/ml与350pg/ml组增殖差异无显著性,表明在此浓度范围FGF的促增殖作用已达极限.FGF对大鼠成肌细胞的蛋白质合成具有明显促进作用,各实验组与对照组均有显微性差异,并且随FGF浓度的增加有上升趋势.结论：成纤维细胞生长因子对大鼠成肌细胞的生长具有促进作用并呈剂量依赖性,该因子对大鼠成肌细胞的蛋白质代谢具有促进作用并呈剂量依赖性,其作用机制还需要进一步探讨.成纤维细胞生长因子对培养中大鼠成肌细胞作用表明：成纤维细胞生长因子有可能作为治疗肌肉损伤的药物.
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