【摘 要】
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目的将HIV-2的跨膜蛋白gp36进行截短与串联,表达出的目的蛋白用于HIV体外检测。方法 PCR方法扩增序列,产物经BamHⅠ和XhoⅠ双酶切后,分别连入pET32a、pET28MBP质粒,得到两株
【机 构】
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华东理工大学生物工程学院生物化学与分子生物学; 上海科华生物工程股份有限公司;
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目的将HIV-2的跨膜蛋白gp36进行截短与串联,表达出的目的蛋白用于HIV体外检测。方法 PCR方法扩增序列,产物经BamHⅠ和XhoⅠ双酶切后,分别连入pET32a、pET28MBP质粒,得到两株重组表达载体,分别导入表达宿主细胞,经IPTG诱导表达出两株目的蛋白。结果扩增出目的片段,得到正确的重组载体,并表达出与理论分子量一致的两种融合蛋白,用于ELISA检测相应抗体具有良好的敏感性和特异性。结论构建出可用于HIV检测的gp36表达载体,为跨膜蛋白gp36的进一步应用研究奠定基础。
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