【摘 要】
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探讨正常人原代角质形成细胞(NHK)与成纤维细胞共培养重建人工皮肤AltSkin的方法，为化妆品检测用皮肤模型的建立奠定基础。方法分离正常原代人NHK细胞和成纤维细胞，采用筏式培养法，先将成纤维细胞与复合胶原凝胶支架共培养5d构建真皮，再于其表面放置NHK细胞，无血清培养基气．液界面培养10-12d完成皮肤重建，形态学和角蛋白PAN、CK10、波形蛋白、层粘连蛋白免疫组化观察。结果原代分离的NHK
【机 构】
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广东出入境检验检疫技术中心食品实验室,广州 510623 广州市华代生物科技研究所,广州,5106
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探讨正常人原代角质形成细胞(NHK)与成纤维细胞共培养重建人工皮肤AltSkin的方法，为化妆品检测用皮肤模型的建立奠定基础。方法分离正常原代人NHK细胞和成纤维细胞，采用筏式培养法，先将成纤维细胞与复合胶原凝胶支架共培养5d构建真皮，再于其表面放置NHK细胞，无血清培养基气．液界面培养10-12d完成皮肤重建，形态学和角蛋白PAN、CK10、波形蛋白、层粘连蛋白免疫组化观察。结果原代分离的NHK细胞呈PAN阳性。成纤维细胞可在复合胶原凝胶支架内粘附和增殖形成真皮结构，NHK细胞可在支架表面分化增殖形成含基底层、棘层和角化层的复层表皮结构，免疫组化表明角质层细胞呈CK10阳性，基底膜呈波形蛋白和层粘连蛋白阳性。结论AltSkin替代皮肤是由NHK增殖形成的角化复层表皮结构和复合胶原凝胶真皮结构共同构成的全层皮肤模型。
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