【摘 要】
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目的:探讨肿瘤微环境中PTEN对CCL2、VEGF及NHEFR1/EBP50继而对巨噬细胞表型转化影响.方法:用小鼠乳腺癌4T1培养细胞上清(33.3％稀释比例)培养驯化RAW264.7细胞24至72小时模拟肿瘤微环境.将驯化后的RAW264.7细胞通过小干扰RNA技术沉默PTEN基因,或是通过加入PI3K抑制剂LY294002提高PTEN的表达建立两个PTEN不同表达水平的细胞模型.采用RT-P
【出 处】
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中国免疫学会第九届全国免疫学学术大会
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目的:探讨肿瘤微环境中PTEN对CCL2、VEGF及NHEFR1/EBP50继而对巨噬细胞表型转化影响.方法:用小鼠乳腺癌4T1培养细胞上清(33.3％稀释比例)培养驯化RAW264.7细胞24至72小时模拟肿瘤微环境.将驯化后的RAW264.7细胞通过小干扰RNA技术沉默PTEN基因,或是通过加入PI3K抑制剂LY294002提高PTEN的表达建立两个PTEN不同表达水平的细胞模型.采用RT-PCR,qPCR及Western blot 检测PTEN、CCL2、VEGF、HIF-1α,和NHEFR1/EBP50在mRNA及蛋白水平的表达;采用ELISA技术检测CCL2在细胞上清中的分泌情况;采用免疫荧光技术检测不同处理后PTEN和NHEFR1/EBP50两个蛋白表达的相关趋势.
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