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研究背景:母-胎界面免疫耐受是保证成功妊娠的关键,Tim-3在多种类型免疫细胞中表达,可通过与其配体结合调节免疫耐受。小鼠实验表明,阻断Tim-3可导致炎性粒细胞和巨噬细胞在子宫胎盘界面聚集,引起局部炎症反应、打破母-胎界面免疫耐受最终导致妊娠失败,提示Tim-3在妊娠免疫耐受的调节中发挥重要作用,然而有关Tim-3在人妊娠早期的表达及功能仍不清楚。目的:检测Tim-3在外周、蜕膜组织中的表达,探讨其在母胎界面免疫耐受中的作用及机制。方法:RT-PCR、流式细胞术检测PBMC及蜕膜组织中Tim-3的表达,流式细胞术检测蜕膜NK(dNK)表面受体分子的表达。免疫磁珠分选dNK,Tim-3-Fc抗体阻断Tim-3信号通路,悬浮芯片/ELISA检测细胞因子表达;RT-PCR检测滋养层细胞系HTR-8 Galectin-9的表达;分别以转染Galectin-9 siRNA的HTR-8或者rhGalectin-9处理的HTR-8为靶细胞,以磁珠分选的外周NK(pNK)为靶细胞,CKK-8法检测NK细胞杀伤作用,流式检测脱颗粒作用。结果:Tim-3主要表达于NK细胞上,与未孕对照相比,早孕pNK表达Tim-3的水平显著上调,同时我们也检测了Tim-3在蜕膜淋巴细胞中的表达,结果显示Tim-3主要在dNK中表达,且其表达水平高于pNK。Tim-3~+dNK细胞表达CD69、CD11b和CD94的水平显著高于Tim-3~-dNK,利用Tim-3-Fc抗体阻断Tim-3可显著抑制dNK细胞IFN叫及TNF-α的水平,提示Tim-3可能是dNK细胞的活化标志分子。此外,我们的结果显示Tim-3以Galectin-9依赖的方式抑制NK细胞对滋养层细胞系HTR-8的杀伤。机制研究表明,Tim-3-Galectin-9抑制NK细胞脱颗粒过程。最后,我们比较分析习惯性流产患者(RSA)pNK细胞Tim-3的表达,结果提示pNK Tim-3的低表达与RSA存在相关性。结论:我们的结果表明妊娠过程中NK细胞通过高表达Tim-3使得NK细胞处于"特殊"的活化状态,保证NK细胞分泌大量抗病原体细胞因子的同时,又以Tim-3-Gal-9通路抑制NK细胞对滋养层细胞的杀伤,既保证妊娠过程中机体系统免疫防御又维持了妊娠免疫耐受的形成,保证成功妊娠。