【摘 要】
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目的 :通过研究与活化的CD4+T细胞共培养后脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSCs)中C3、C3a R、C5a R1、B因子(complement factor B,CFB)、H因子
【机 构】
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南京大学医学院附属鼓楼医院风湿免疫科;
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目的 :通过研究与活化的CD4+T细胞共培养后脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSCs)中C3、C3a R、C5a R1、B因子(complement factor B,CFB)、H因子(complement factor H,CFH)五种补体分子m RNA的表达变化,筛选鉴定差异性表达分子,为进一步探讨补体分子调节UC-MSCs功能的机制提供研究靶点。方法 :将体外培养的P5-P8代UC-MSCs接种于24孔板,加入0.5ml DMEM-F12完全培养基培养过夜,待MSC完全贴壁后,去除培养基,每孔加入105经免疫磁珠分选的外周血CD4+T细胞,用RPMI1640完全培养基补充体积至0.5ml,同时每孔加入抗人CD3及抗人CD28单克隆抗体(终浓度3μg/μl),72h后分离上清和悬浮细胞,提取贴壁UC-MSCs的总RNA,利用real-time PCR方法比较两组间的差异。结果 :共培养组及非共培养组UC-MSC均组成性表达上述5种补体分子的m RNA。两组细胞的C3、C3a R及CFB的m RNA表达无显著性差异,与活化CD4+T细胞共培养,显著增强UC-MSCs C5a R1(7.64±0.47 vs.10.06±0.50,p=0.005)及CFH基因的表达(1.46±0.30 vs.3.53±0.70,p=0.04)。结论 :人UC-MSCs组成性表达多个补体分子基因,活化的CD4+T细胞可增强UC-MSCs过敏毒素C5a受体基因的表达,对负调控补体激活的CFH基因也具有上调作用,提示炎症环境可能通过调节UC-MSCs过敏毒素受体表达对其发挥趋化作用,UC-MSCs则通过上调CFH抑制补体活化,从而发挥免疫抑制作用并逃避宿主免疫系统攻击。
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