解淀粉芽孢杆菌电转方法的优化研究

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芽孢杆菌在高渗透压的条件下,易转化为感受态细胞.甘氨酸的加入有助电击时保护细胞膜.本文通过甘露醇山梨醇制造高渗透压,同时调整甘氨酸加入时期、细胞生长程度及电转电压的调整,建立了感受态细胞对质粒pWB980的高效电转化方法.当OD600为0.8时加入甘氨酸,培养至OD600为1.6时停止生长、转化时电压为2100V的时候,可以得到536个转化子,经鉴定均为阳性克隆子.而常规电转化的最高仅为20个转化子.为以解淀粉芽孢杆菌为宿主进行高效电转化提供了模型,也为建立适合工业应用的分泌型表达载体的构建打下了一定基础.
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