【摘 要】
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目的：通过Wnt经典信号通路调控人牙周膜干细胞骨向分化过程中关键基因、蛋白的表达,改变干细胞骨向分化能力.方法：通过单克隆方法获得人牙周膜干细胞,选取第三代细胞进行试
【机 构】
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第三军医大学大坪医院野战外科研究所口腔科
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目的：通过Wnt经典信号通路调控人牙周膜干细胞骨向分化过程中关键基因、蛋白的表达,改变干细胞骨向分化能力.方法：通过单克隆方法获得人牙周膜干细胞,选取第三代细胞进行试验.采用Wnt信号通路阻断剂DKK-1抑制Wnt/β-catenin信号通路.在常规培养条件下以及成骨诱导条件下按照0、10、50、100 ng/mL的浓度对牙周膜干细胞进行干扰,对照组加入PBS,7d后Western Blot检测Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白β-catenin、LEF-1的变化,Real time PCR检测成骨基因RUNX2、ALP、OCN的变化.结果：在成骨分化过程中β-catenin的表达水平显著降低(P＜0.01). 50ng/m L,100 ng/m L DKK-1可显著抑制β-catenin及下游的LEF-1的表达水平.在不同浓度DKK-1作用下RUNX2、ALP、OCN的表达水平有不同程度的上调,其中100 ng/m L浓度作用下成骨基因上调最为明显(P＜0.01).结论：Wnt/β-catenin信号通路在牙周膜干细胞骨向分化过程中发挥重要作用,阻断Wnt通路后干细胞骨向分化能力增强,可通过调控Wnt通路改变干细胞的成骨能在,为干细胞在组织再生中的研究及应用提新的方法.
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