【摘 要】
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[目的] 探讨多种不同染色技术在观察SIRT1基因敲除小鼠膝关节骨关节炎软骨组织形态学研究中的染色规律及应用中的优缺点。[方法] 将健康小鼠膝关节软骨组织样本分为四组：SIRT1+/+小鼠假手术组；SIRT1+/+小鼠骨关节炎模型组；SIRT1-/-小鼠假手术组；SIRT1-/-小鼠骨关节炎模型组。对标本固定、脱钙后进行石蜡包埋、切片。分别采用HE染色、阿利新蓝染色、甲苯胺蓝染色、番红O-固绿染色
【出 处】
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中华医学会第十八届骨科学术会议暨第十一届COA国际学术大会
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[目的] 探讨多种不同染色技术在观察SIRT1基因敲除小鼠膝关节骨关节炎软骨组织形态学研究中的染色规律及应用中的优缺点。[方法] 将健康小鼠膝关节软骨组织样本分为四组：SIRT1+/+小鼠假手术组；SIRT1+/+小鼠骨关节炎模型组；SIRT1-/-小鼠假手术组；SIRT1-/-小鼠骨关节炎模型组。对标本固定、脱钙后进行石蜡包埋、切片。分别采用HE染色、阿利新蓝染色、甲苯胺蓝染色、番红O-固绿染色、Masson染色、Van Gieson染色、苦味酸天狼星红染色、SA-β-gal半乳糖苷酶衰老染色和Ⅱ型胶原免疫组化染色,观察骨关节炎关节软骨组织形态学变化,并对几种染色方法进行比较。[结果] HE染色、番红O-固绿染色、Masson染色可以显示骨关节炎关节软骨的一般形态结构,SIRT1-/-小鼠骨关节炎模型组关节软骨退变最为严重,软骨表面破坏,四层结构分辨不清,软骨细胞数量减少,分布紊乱；甲苯胺蓝染色、阿利新蓝染色、番红O-固绿染色在对软骨组织的特异性定位方面有一定的优势,SIRT1-/-小鼠骨关节炎模型组软骨组织破坏,染色变浅甚至失染；Masson、阿利新蓝染色、Van Gieson染色、苦味酸天狼星红染色和Ⅱ型胶原免疫组化染色可以对Ⅱ型胶原的分布进行定位,SIRT1-/-小鼠骨关节炎模型组Ⅱ型胶原破坏严重,含量明显降低；SA-β-gal半乳糖苷酶衰老染色则对衰老软骨细胞的观察效果最佳,SIRT1-/-小鼠骨关节炎模型组衰老软骨细胞的数量明显增多。[结论]在观察SIRT1基因敲除小鼠膝关节骨关节炎软骨组织切片中,Masson染色最有利于获得软骨组织的全面信息；阿利新蓝染色和番红O-固绿染色在对软骨组织的特异性定位方面优势最为明显；Ⅱ型胶原免疫组化染色对Ⅱ型胶原的分布定位准确,并有利于对Ⅱ型胶原的量进行量化；SA-β-gal半乳糖苷酶衰老染色则对衰老软骨细胞的观察效果最佳,有利于对软骨组织的衰老程度进行量化。
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