猪繁殖与呼吸综合征病毒重组N蛋白间接ELISA方法的建立

来源 :第五届(秋季)南京农业大学畜牧兽医学术年会猪业峰会——规模猪场疫病综合防控研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wallacedfgf
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  用纯化的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组核衣壳(N)蛋白作为包被抗原,建立了PRRSV抗体检测的间接ELISA方法,并优化确定了ELISA最佳工作条件:重组抗原包被浓度为13.3μg/mL,37℃1h或4℃过夜;5%脱脂乳37℃封闭2h;血清1:40稀释,37℃作用90min;酶标二抗1:4000稀释,37℃作用40min;底物TMB溶液37℃显色15min;统计学分析后确定阴阳性的临界值为0.434。与美国IDEXX公司PRRSV抗体检测试剂盒相比较,其相对特异性和敏感性分别为93.0%和95.6%,符合率达到94.7%,检测结果无显著性差异。
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