【摘 要】
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为了能够快速、准确定量小鼠Bax基因的mRNA，本实验构建了小鼠Bax基因的标准品质粒和标准曲线。本研究采用SYBR GreenⅠ染料法进行实时荧光定量PCR，由于Ct值相对固定，重复性好，以不同浓度标准品质粒DNA分别进行荧光定量PCR扩增，发现起始浓度越高，Ct值越小，即起始模板浓度与Ct值之间呈良好的线性关系，因此，制定的标准曲线具有很高的线性相关性、敏感性，使得实验结果更精确并具有很高的可
【机 构】
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中国兽医药品监察所病毒室,北京100193
【出 处】
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2013年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会学术研讨会
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为了能够快速、准确定量小鼠Bax基因的mRNA，本实验构建了小鼠Bax基因的标准品质粒和标准曲线。本研究采用SYBR GreenⅠ染料法进行实时荧光定量PCR，由于Ct值相对固定，重复性好，以不同浓度标准品质粒DNA分别进行荧光定量PCR扩增，发现起始浓度越高，Ct值越小，即起始模板浓度与Ct值之间呈良好的线性关系，因此，制定的标准曲线具有很高的线性相关性、敏感性，使得实验结果更精确并具有很高的可靠性。本研究中，目的基因Bax为单一的溶点峰，表明实验中无引物二聚体和非特异性条带的扩增，产物纯度高，特异性好，通过10倍递减稀释标准品质粒浓度所得到的Ct值绘制标准曲线的相关系数高达0.999，说明质粒各个梯度间相关性较好，标准曲线的可靠性强，能够保证数据的精确性，可用于统计学分析及后续样品的定量。
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