滞育七星瓢虫糖代谢调控酶的差异表达及其功能

来源 :中国植物保护学会2014年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yys68738464
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  七星瓢虫(Coccinell septempunctataL)是农田生态系统中的优势天敌,其环境适应性强、繁殖能力高,可捕食多种蚜虫、介壳虫、木虱、鳞翅目幼虫的卵及低龄幼虫等害虫,被国内外多家机构大规模饲养及商品化生产.七星瓢虫的长期贮存是该天敌扩繁应用的难点,利用滞育调控技术可较好地解决该问题.七星瓢虫的滞育诱导、滞育维持和滞育解除技术已被我们研究掌握,对该天敌产品的长期贮运具有积极意义,进一步开展滞育关联蛋白的研究,有助于了解瓢虫滞育的理论机制,指导生产实践.利用昆虫双向电泳及质谱检测技术,研究了七星瓢虫滞育相关蛋白的差异表达.分别对羽化24h及滞育40d的七星瓢虫雌虫进行整头取样,采用酚抽提法提取虫体全蛋白;用24cm、pH3 -10的IPG线性干胶条、被动水化、1000μg上样量及胶体考马斯亮蓝染色方法,进行样品的双向电泳凝胶制备;通过凝胶染色分析,得到滞育个体与正常发育个体的表达差异蛋白点,并对差异表达的蛋白点进行手动切取,放人离心管中,经清洗、酶解后,进行ESI-QUAD-TOF二级质谱检测.对质谱检测后可匹配的蛋白进行分析,发现在滞育个体中,存在一种与糖代谢相关的酶-Phospoglyceromutase,登录号为gil 33088811,在滞育个体内上调表达,滞育/非滞育含量差异为2.86427.进一步分析表明,该酶具有磷酸甘油变位酶的活性,是生物体内糖代谢的关键酶,包含了一个组氨酸残基磷酸化位点,在糖酵解及糖异生中,催化3-磷酸甘油酸和2-磷酸甘油酸之间的相互转换,进而可调节糖酵解与其他ATP产生通路以及糖异生之间的平衡.糖原是动物细胞中普遍存在的多糖,对昆虫来讲相当重要;海藻糖则是昆虫血糖的主要组成,在昆虫体内循环运转.在昆虫体内,6-磷酸葡萄糖是调节海藻糖(循环运转形式)和糖原(组织贮藏形式)合成的中心.糖原经水解转变为葡萄糖,进入糖酵解途径,糖酵解的产物经三羧酸循环后释放出大量能量,供生物进行正常的生命活动.前期相关的研究表明,在七星瓢虫雌成虫滞育期间,参与三羧酸循环的关键酶异柠檬酸脱氢酶表达下调,该酶催化异柠檬酸到α一酮戊二酸的反应,反应不可逆,为三羧酸循环中的限速步骤;此外,与脂类代谢相关的酶类的表达也有差异,促进了脂肪的合成.这与七星瓢虫滞育期间取食量低、能量消耗少及滞育期间腹部脂肪体含量丰富相吻合.因此可推测,在滞育期间,糖酵解速率减慢,糖异生速率加快,进而促进了糖原等贮能物质的合成.该研究结果,进一步填补了七星瓢虫滞育理论研究的空缺,丰富了滞育关联蛋白的类群,为七星瓢虫滞育机理的研究奠定了基础.
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