论文部分内容阅读
本研究以香菇菌16(L.edodes16)和糙皮侧耳菌45(P.ostreatus 45)为研究对象,通过RT-PCR分别获得其锰过氧化物酶基因lemnp和pomnp,以已发表的黄抱原毛平革菌的锰过氧化物酶三维结构为基础,通过同源比对找出黄抱原毛平革菌2、香菇菌16和糙皮侧耳菌45锰过氧化物酶的保守氨基酸序列,进行定点突变后在毕赤酵母(P.pastoris)GS115中表达。选择突变的氨基酸包括位于活性中心的保守氨基酸,靠近活性中心区域和远离活性中心区域的氨基酸,与Mn2+,Ca2+和血红素结合的氨基酸以及位于疏水区域通道的氨基酸。通过酶活和酶学性质变化找出影响酶活的关键氨基酸,为解析酶结构及对其进行分子改造奠定理论基础。