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背景:机体免疫细胞有效识别病毒入侵并及时触发抗病毒应答对于抵抗病毒感染至关重要。巨噬细胞介导的天然抗病毒应答主要通过模式识别受体(PRRs)对病毒核酸的识别来实现,其中RIG-I样受体(RIRs)主要参与胞质短链RNA的识别。RIG-I可识别并结合病毒的5’-pppRNA,并活化线粒体接头蛋白MAVS,激活下游信号,最终激活转录因子IRF3/7和NF-κ3,促进干扰素和炎症因子的转录,发挥抗病毒作用。miR-33/33~*是胆固醇调节的关键分子,在细胞能量代谢中发挥重要作用。先前研究表明miR-33可通过调节细胞膜脂筏含量,促进TLR诱导的巨噬细胞炎症应答,且其表达受TRIF信号调控。然而miR-33在巨噬细胞抗病毒免疫中的功能还未有研究。目的:探究miR-33/33~*在巨噬细胞介导的抗病毒免疫中的作用及机制。方法:RNA病毒VSV感染或PolyI:C转染巨噬细胞,不同时间点收集细胞RNA,RT-qPCR检测miR-33/33~*表达水平。miR-33/33~*模拟物和抑制剂转染巨噬细胞,48h后给予病毒刺激,RT-qPCR和流式细胞术检测病毒拷贝;RT-qPCR和EIISA检测干扰素及炎症因子的基因表达和蛋白分泌;蛋白免疫印迹法检测RIG-I信号活化;激光共聚焦检测MAVS及线粒体的形态变化。结果:VSV感染或PolyI:C转染巨噬细胞可引起miR-33/33*及其管家基因Srebf-2表达下调,用IFNAR1抗体阻断干扰素信号后,再以病毒刺激,发现上述下调消失,提示RIG-I信号可通过干扰素通路介导Srebf-2-miR-33/33~*轴的下调。过表达miR-33/33~*能促进VSV感染巨噬细胞,而敲低则能抑制VSV感染,但miR-33/33~*对DNA病毒HSV的感染无调控作用。同时,miR-33/33~*过表达后,病毒刺激后的干扰素产生显著降低,而抑制后则可促进干扰素的产生。蛋白免疫印迹显示miR-33/33~*能抑制TBK1、IRF3及P65的磷酸化激活,提示其作用靶点可能位于TBK1上游。共聚焦显微镜观察,发现miR-33/33~*可能通过干扰线粒体的功能,从而影响MAVS活化。结论:巨噬细胞受到RNA病毒感染后,可通过干扰素信号下调自身miR-33/33~*的表达,以降低其对RIG-I介导的抗病毒信号通路的抑制,从而维持机体抗病毒信号的稳定。