【摘 要】
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目的 暴露于烹调油烟PM2.5能够诱导氧化应激和增加不良妊娠结局的风险.探讨ROS-AKT-mTOR信号通路在烹调油烟PM2.5诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)自噬中的作用.方法 不同浓度的烹调油烟PM2.5处理HUVECs不同时间,及添加或不添加NAC前后,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞存活率、DCFH-DA染色法检测细胞内ROS水平、透射电子显微镜(TEM)法检测细胞内自噬小体、细
【机 构】
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安徽医科大学公共卫生学院职业卫生与环境卫生学系 上海市普陀区疾病预防控制中心慢性病防治科
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目的 暴露于烹调油烟PM2.5能够诱导氧化应激和增加不良妊娠结局的风险.探讨ROS-AKT-mTOR信号通路在烹调油烟PM2.5诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)自噬中的作用.方法 不同浓度的烹调油烟PM2.5处理HUVECs不同时间,及添加或不添加NAC前后,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞存活率、DCFH-DA染色法检测细胞内ROS水平、透射电子显微镜(TEM)法检测细胞内自噬小体、细胞免疫荧光法检测自噬相关蛋白(LC3-Ⅰ/Ⅱ和beclin 1)在细胞中的分布情况、western blot检测ROS-AKT-mTOR信号通路相关蛋白的表达情况.结果 细胞存活率和细胞内ROS荧光强度随着染毒浓度和时间的增加分别呈现剂量-反应关系和时间-反应关系.细胞免疫荧光法和western blot均显示烹调油烟PM2.5处理细胞后可引起LC3-Ⅱ和beclin 1水平的增加,NAC或3-MA共培养细胞后LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值有所降低.TEM证实烹调油烟PM2.5处理细胞后可增加细胞内自噬小体的形成,NAC共处理后,可减少细胞内自噬小体的形成.此外,western blot显示烹调油烟PM2.5处理细胞后,细胞内PI3K, AKT和mTOR的磷酸化蛋白占总蛋白比值均有降低,NAC共处理组能增加PI3K、AKT、mTOR磷酸化蛋白占总蛋白比值.结论 ROS-AKT-mTOR信号通路在烹调油烟PM2.5引起的HUVECs自噬中起到重要作用.
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