【摘 要】
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Mx蛋白是Ⅰ型干扰素诱导的抗病毒蛋白质家族成员之一.本实验用100μg/mL Poly(I：C)处理草鱼肾细胞(CIK细胞),分别在处理12h、36h、48h后观察其细胞形态,同时提取细胞总RNA
【机 构】
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湖州师范学院生命科学学院,浙江湖州,313000
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Mx蛋白是Ⅰ型干扰素诱导的抗病毒蛋白质家族成员之一.本实验用100μg/mL Poly(I：C)处理草鱼肾细胞(CIK细胞),分别在处理12h、36h、48h后观察其细胞形态,同时提取细胞总RNA,利用RT-PCR方法检测细胞内Mx蛋白基因的表达.观察其细胞形态发现,经Poly(I∶C)处理后的细胞形态变为梭形或不规则三角形,且随着处理时间的不同发生不同程度的细胞脱落现象.RT-PCR结果显示在36h、48h扩增出了预期的820bp左右的条带,说明了用Poly(I∶C)处理的草鱼肾细胞中有Mx蛋白基因的表达.根据已报道的鱼类Mx蛋白eDNA序列设计合成特异引物,应用RT-PCR,从Poly(I∶C)诱导的草鱼肾细胞总RNA中扩增获得Mx蛋白eDNA,回收纯化后克隆到pMD20-T Vector 系统的T载体上.重组子的序列分析表明：所克隆的Mx蛋白cDNA长814 bp,编码270个氨基酸,具有脊椎动物Mx蛋白共有的结构特征
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