【摘 要】
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PKR(protein kinase dependent dsRNA)是由干扰素诱导产生的、依赖双链RNA(dsRNA)激活的蛋白激酶,能抑制细胞和病毒蛋白的合成,是构成细胞抗病毒的第一道防线,而草鱼的病
【机 构】
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湖州师范学院生命科学学院,湖州313000
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PKR(protein kinase dependent dsRNA)是由干扰素诱导产生的、依赖双链RNA(dsRNA)激活的蛋白激酶,能抑制细胞和病毒蛋白的合成,是构成细胞抗病毒的第一道防线,而草鱼的病毒性疾病又比较严重,故本实验克隆了草鱼的PKR基因,以期为草鱼抗病毒基因研究做出一定的探索.本实验依据Genbank上斑马鱼(AJ852023.1)和鲫鱼(AY293929.1)的PKR基因序列,利用Primer Premier5.0软件设计了3对简并引物；采用100μg/mL Poly(I：C)体外分别处理草鱼肾细胞(Ctenopharyngodon indellus kidney cells,CIK)12h、36h、48h,并提取处理后细胞的总RNA,逆转录之后用降落PCR方法扩增这三个处理时间细胞中PKR基因,实验结果表明处理12h的未扩增出该基因,处理36h和48h的都扩增到了该基因,并且表达量随处理时间的增加有所升高,扩增到的部分序列与鲫鱼和斑马鱼的该段序列同源性分别为100％和81.46％.
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