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目的：建立EV71空斑测定方法，为EV71病毒生物学研究提供手段。
方法：将不同稀释度的EV71病毒株分别接种至RD细胞或Vero细胞单层，然后加甲基纤维素覆盖。计算空斑滴度。通过三次连续检测观察空斑法的稳定性，并对空斑法和微量细胞病变法检测病毒滴度进行比较。
结果：采用RD细胞或Vero细胞通过空斑法对EV71滴度进行检测，96h后均能规律的出现边缘整齐、清晰的空斑，其中RD细胞检测的空斑直径为1～2mm，Vero细胞检测的空斑直径为0.5～1mm。与微量细胞病变法比较，二者有很好的线性相关性，相关系数为r=0.972，P=0.006。连续三次重复试验结果显示，不同时间对相同病毒株的滴度检测水平无显著差异，试验间变异系数的平均值Vero细胞为2.52％，RD细胞为4.49％。
结论：建立的EV71空斑测定方法稳定性好、出斑规律。