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将含有狂犬病毒G+N的重组穿梭质粒pAdTrack-CMV/G+N与腺病毒骨架载体pAdEasy-1在大肠杆菌细胞内同源重组，获得带有目的基因的重组腺病毒载体pAd/G+N。将重组腺病毒载体经PacI酶切后转染HEK-293细胞获得带有目的基因的重组腺病毒。重组腺病毒在HEK-293细胞中连续传代15代次，病毒在细胞的病变时间缩短在20h以内。经测定，重组腺病毒对HEK-293细胞的TCID50达10-7.50/ml。用RT-PCR对重组腺病毒进行检测，可以检测到狂犬病毒糖蛋白和核蛋白基因片段。重组腺病毒经口服免疫小白鼠，21天后用狂犬病毒CVS毒株进行脑内攻击，观察10天，免疫保护率达60％。